Одним из часто применяемых в химиотерапии злокачественных опухолей лекарственных средств является препарат «Ломустин», включающий в качестве действующего вещества 1-(2-хлорэтил)-3-циклогексил1-нитрозомочевину [1–4]. В Государственной фармакопее XIV издания, в отличие от Европейской фармакопеи, отсутствует какая-либо информация об анализе субстанции препарата «Ломустин» на содержание примесей и действующего вещества. Зачастую в составе препарата присутствуют специфические примеси А (1,3-бис (2-хлорэтил) мочевина), В (1-(2-хлорэтил)-3-циклогексилмочевина) и С (1,3-дициклогексилмочевина) (рис. 1), определение которых по требованию Европейской фармакопеи является обязательным. При этом допустимое содержание специфических примесей нормируется методом ТСХ [5, 6].
Ранее нами была показана возможность применения метода ВЭЖХ-МС/МС высокого разрешения для идентификации и количественного определения специфических примесей А, В и С в субстанции препарата «Ломустин». Помимо разработанной методики, в результате работы также было выявлено присутствие новой, не регламентируемой Европейской фармакопеей примеси с характерным значением m/z = 169,1342, которая, по нашему мнению, может являться продуктом деградации специфической примеси В [7]. Целью настоящего исследования являлось подтверждение образования вещества с m/z = 169,1342 из специфической примеси В в растворах и выявление динамики этого процесса методом ВЭЖХ-МС/МС высокого разрешения.
Оборудование
Хроматографическое разделение осуществляли с использованием системы ВЭЖХ-МС/МС с диодно-матричным (Agilent Technologies, США) и тандемным масс-селективным детектором Q-TOF Maxis Impact (Bruker Daltonics, Германия) с источником ионизации электроспрей (ESI). Данные обрабатывались с использованием программного обеспечения Сompass HyStar (Version 3.2 Build 49.9).
Для приготовления растворов применяли ультразвуковую ванну Branson (Emerson, США), аналитические весы Sartorius TE64 (Sartorius AG, Германия), дозаторы переменного объема 20– 200 мкл и 100–1000 мкл (Sartorius AG, Германия), мерные пипетки 1, 2 и 5 мл (HIRSCHMANN, Carl Roth GmbH, Германия).