По всем вопросам звоните:

+7 495 274-22-22

УДК: 615.277 DOI:10.33920/med-02-2102-05

Рекомбинантные антигены щитовидной железы, получение и применение в диагностике и лечении аутоиммунных заболеваний

Зубков Александр Владимирович канд. мед. наук, заведующий лабораторией ФГБНУ «НИИВС им. И.И. Мечникова»; 105064, г. Москва, Малый Казенный пер., д. 5а; 8 (903) 6180278; email: alex_zubkov@list.ru; https://orcid.org/0000-0002-0056-5082, ФГБНУ «НИИВС им. И. И. Мечникова», г. Москва, Россия

Открываются новые возможности в исследовании взаимосвязи антигенной структуры аутоантигенов щитовидной железы и аутоантител в изучении патогенеза аутоиммунных заболеваний щитовидной железы: диффузного токсического зоба (ДТЗ) и аутоиммунного тиреодита (АИТ) с помощью синтезированных рекомбинантных белков рецептора тиреотропного гормона (рТТГ) и тиреопероксидазы (ТПО) человека. В представленной работе продемонстрированы результаты клонирования фрагментов генов, кодирующих участки внеклеточного домена ТПО и фрагменты последовательности РНК α-субъединицы рТТГ, не содержащие нуклеотидных замен. Получены рекомбинантные векторы для экспрессии белков α-субъединицы рецептора тиреотропного гормона и фрагментов внеклеточного домена ТПО.

Литература:

1. Smith T.J. TSHR as a therapeutic target in Graves’ disease. Expert Opin Ther Targets. 2017; 21 (4): 427–432.

2. Rapoport B., McLachlan S.M. TSH receptor cleavage into subunits and shedding of the A-subunit; a molecular and clinical perspective. Endocrine Reviews. 2016; 37 (2): 114–34.

3. Sanders J., Bolton J., Sanders P., Jeffreys J., Nakatake N., Richards T., Evans M., Kiddie A., Summerhayes S., Roberts E., Miguel R.N., Furmaniak J., Smith B.R. Effects of TSH receptor mutations on binding and biological activity of monoclonal antibodies and TSH. Thyroid. 2007; 17 (2): 1195–1206.

4. Furmaniak J., Sanders J., Núñez Miguel R., B. Rees Smith. Mechanisms of Action of TSHR Autoantibodies. Horm Metab Res. 2015; 47: 735–752.

5. Parmentier M., Libert F., Maenhaut C., Lefort A., Gerard C., Perret J., Van Sande J., Dumont J. E., Vassart G. Molecular cloning of the thyrotropin receptor. Science. 1989; 246 (4937): 1620–1622.

6. Gardas A., Watson P. F., Hobby P., Smith A., Weetman A.P., Sutton, B. J. and Banga J.P. Human thyroid peroxidase: mapping of autoantibodies, conformational epitopes to the enzyme surface. Redox. Rep., 2000, 5, p. 237–241

1. Smith T. J. TSHR as a therapeutic target in Graves’ disease. Expert Opin Ther Targets. 2017; 21(4): 427–432.

2. Rapoport B., McLachlan S.M. TSH receptor cleavage into subunits and shedding of the A-subunit; a molecular and clinical perspective. Endocrine Reviews. 2016; 37(2): 114-34.

3. Sanders J., Bolton J., Sanders P., Jeffreys J., Nakatake N., Richards T., Evans M., Kiddie A., Summerhayes S., Roberts E., Miguel R.N., Furmaniak J., Smith B.R. Effects of TSH receptor mutations on binding and biological activity of monoclonal antibodies and TSH. Thyroid. 2007; 17(2): 1195-1206.

4. Furmaniak J., Sanders J., Núñez Miguel R., B. Rees Smith. Mechanisms of Action of TSHR Autoantibodies. Horm Metab Res. 2015; 47: 735–752.

5. Parmentier M., Libert F., Maenhaut C., Lefort A., Gerard C., Perret J., Van Sande J., Dumont J.E., Vassart G. Molecular cloning of the thyrotropin receptor. Science. 1989; 246(4937): 1620-1622.

6. Gardas A., Watson P.F., Hobby P., Smith A., Weetman A.P., Sutton, B.J. and Banga J.P. Human thyroid peroxidase: mapping of autoantibodies, conformational epitopes to the enzyme surface. Redox. Rep., 2000, 5, p. 237–241.

В патогенезе диффузного токсического зоба (ДТЗ) — аутоиммунного заболевания щитовидной железы (АИЗ ЩЖ) рецептор тиреотропного гормона играет основную роль как аутоантиген, вызывающий гиперпродукцию аутоантител (аутоАТ), характеризующуюся устойчивым гипертиреозом [1].

В структуре рТТГ выделяют три домена: внеклеточный, трансмембранный и внутриклеточный. Внеклеточный домен содержит обогащенный лейцином участок и шарнирную область, связанную с трансмембранным доменом. рТТГ при расщеплении рецептора, выделяется фрагмент α-субъединицы, состоящей из обогащенного лейцином участка и шарнирной области, и β-субъединицы, состоящей из С-концевой части рецептора и трансмембранного домена. Для понимания механизмов взаимодействия антител и эпитопов рТТГ необходимо выявить отдельные популяции аутоантител, стимулирующие (стимулирующие аутоАТ), блокирующие (блокирующие аутоАТ) либо регулирующие передачу сигнала от рецептора к внутриклеточным эффекторам тиреоцита. Известно, что α-субъединица рТТГ является основным участком рецептора, к которому формируются аутоАТ [2–4]. Определение аутоантител может быть использовано как для прогноза клинических исходов болезни Грейвса, так и для коррекции состояния пациентов с помощью специфической терапии. В настоящее время усилия многих ученых направлены на создание лабораторных тестов нового поколения для раздельного выявления блокирующих и стимулирующих аутоАТ к рТТГ.

Тиреопероксидаза человека — основной фермент в процессе синтеза гормонов щитовидной железы: трийодтиронина и тироксина. Аутоантитела к ТПО выявляются в сыворотке крови пациентов при ряде аутоиммунных заболеваний: ДТЗ, АИТ и являются одним из важных показателей для постановки диагноза аутоиммунного заболевания.

Клонирование фрагментов рТТГ и ТПО позволяет расширить возможности для изучения аутоиммунных заболеваний щитовидной железы. Целью работы являлось клонирование фрагментов рТТГ и ТПО человека, получение и анализ рекомбинантных белков аутоантигенов щитовидной железы.

Для Цитирования:
Зубков Александр Владимирович, Рекомбинантные антигены щитовидной железы, получение и применение в диагностике и лечении аутоиммунных заболеваний. Врач скорой помощи. 2021;2.
Полная версия статьи доступна подписчикам журнала
Язык статьи:
Действия с выбранными: