По всем вопросам звоните:

+7 495 274-22-22

УДК: 619:615.371

Разработка методов получения ботулинических антигенов и их сравнение

Э. Мустафина канд. вет. наук, вед. науч. сотр., e-mail: vnivi@mail.ru, ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, Россия, г. Казань, Научный городок-2
Н. Садыков д-р вет. наук, проф., гл. науч. сотр., e-mail: vnivi@mail.ru, ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, Россия, г. Казань, Научный городок-2
А. Чернов д-р биол. наук, зам. директора по НИР и биобезопасности, e-mail: vnivi@mail.ru, ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, Россия, г. Казань, Научный городок-2
Т. Мустафин канд. биол. наук, зав. лаб., e-mail: swa862@mail.ru, Предприятие «ПромАсептика», 420140, Россия, г. Казань, ул. Минская, д. 6, оф.136

Реакция преципитации относится к числу наиболее простых и ускоренных методов серологического анализа. В основе реакции лежит образование видимой линии преципитации, состоящей из вступивших друг с другом в соединение антител и молекулярных антигенов. По этой причине в данном исследовании мы разрабатываем и сравниваем два метода получения ботулинических антигенов (преципитиногенов) для реакции преципитации. Принцип первого метода состоял в получении ботулинического антигена из возбудителя Clostridium botulinum типа А по методике полного антигена Буавена. Второй метод заключался в выделении ботулинического антигена из комплекса «возбудитель-токсин» Clostridium botulinum типа А. В ходе эксперимента выявлено возникновение групповой реакции преципитации, связанной с гомологической структурой антигенов. Наиболее эффективным и специфичным преципитиногеном для реакции преципитации является ботулинический антиген из возбудителя Clostridium botulinum типа А, полученный по методике «Полного антигена Буавена».

Литература:

1. Бочарова Н. Г. Новая тест-система обнаружения специфических антител // Сб. науч. трудов. – 1979. – Вып. 4. – С. 157–161.

2. Никитин В. М. Справочник серологических реакций. – Кишинев, 1977. – 205 с.

3. Матвеев К. И. Ботулизм. – М., 1959. – 408 с.

4. Лабинская А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. – М.: Медицина, 1978. – 391 с.

5. Пяткин К. Д. Микробиология / К. Д. Пяткин, Ю. С. Кривошеин. – М.: Медицина, 1981. – 511 с.

6. Каздобина И. С. Специфическая индикация биологических средств и лабораторная диагностика инфекционного заболевания // ВПБЗН. – 1985. – Вып. 32. – С. 5–13.

7. Никифоров В. Н. Ботулизм / В. Н. Никифоров, В. В. Никифоров. – М.: Медицина, 1985. – 198 с.

8. Dezfulian M. Kinetics of growth and toxigenicity of Clostridium botulinum in experimental wound botulism / M. Dezfulian, H. G. Bartlett // Infec. andIm-mun. – 1985. – V. 49. – № 2. – P. 452–454.

9. Булатова Т. И. К вопросу о применении РНГА для обнаружения ботулинических токсинов / Т. И. Булатова, К. И. Матвеев // ВПБЗН. – 1966. – Вып. 10. – С. 167.

10. Шамсутдинова А. Х. Методическое указание по индикации ботулинических токсинов в объектах ветеринарного надзора реакцией непрямой гемагглютинации / А. Х. Шамсутдинова, К. Х. Папуниди, Д. А. Кирилюки и др. – ГУВ при ГК СМ СССР, 1989.

11. Бусыгин К. Ф. Люминесцентная диагностика инфекционных болезней животных. – М.: Колос, 1975. – 160 с.

12. Булатова Т. И. Применение люминесцирующих антител для выявления возбудителей ботулизма. Люминесцирующие антитела в микробиологии / Т. И. Булатова, Е. А. Кабанова, А. Я. Кульберг. – М., 1962. – С. 98–116.

13. Мустафина Э. Н. Сравнительная оценка получения нативного нейротоксического комплекса Сlostridium botulinum типа А методом концентрации и высаливания сульфатом аммония / Э. Н. Мустафина, Т. Р. Мустафин, Н. С. Садыков // Ветеринарный врач. – № 4. – 2018. – С. 39–42

Ботулизм – тяжелая интоксикация, возникающая в результате употребления в пищу продуктов, содержащих токсины Clostridium botulinum и характеризующаяся преимущественным поражением центральной и вегетативной нервной системы.

В настоящее время известно 8 типов возбудителя ботулизма (А, В, Сα, Cβ, D, E, F, G), которые отличаются между собой по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов и некоторыми другими признаками.

Возбудитель ботулизма относится к политропным представителям микробов, которые в ходе инфекционного процесса занимают ряд последовательных локализаций в организме, тем самым обнаруживая свою адаптированность к ряду различных органов и тканей. Однако это есть единая форма болезни, в которой локализация возбудителя соответствуют разным стадиям болезни (кишечник, печень, легкие, нервная система).

Анализируя литературные данные по вопросу обнаружения антигенов и антител вообще, токсинов микробного происхождения в частности, можно заключить, что в этих целях наиболее перспективными являются иммуноферментный анализ [1], реакция непрямой гемагглютинации [2], хотя самым распространенным в настоящее время методом индикации ботулинического токсина является биопроба с реакцией нейтрализации токсина на белых мышах [3–8].

Для индикации ботулинических токсинов во внешней среде применяли также РНГА [9, 10] и люминесцентный анализ с использованием флуоресцирующих антител [11, 12].

Диагностика ботулизма имеет целый ряд проблем. Это, во-первых, связано со сложностью культивирования клостридий как анаэробов и отсутствием селективных сред для них. Кроме того, единственным методом, позволяющим с высокой чувствительностью идентифицировать ботулинические нейротоксины, является биопроба на мышах в сочетании с реакцией нейтрализации специфическими анатоксинами. Данный метод требует большого количества лабораторных животных, использование которых в настоящее время принято считать неэтичным. Помимо этого, биопроба также не всегда обеспечивает получение необходимой информации. По статистическим данным, 65 % клинических случаев ботулизма не имеют лабораторного подтверждения.

Для Цитирования:
Э. Мустафина, Н. Садыков, А. Чернов, Т. Мустафин, Разработка методов получения ботулинических антигенов и их сравнение. Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2019;10.
Полная версия статьи доступна подписчикам журнала
Язык статьи:
Действия с выбранными: