В настоящее время более 80 % всей инфекционной патологии человека вызывается различными вирусными агентами.
С каждым годом численность вирусов, вызывающих заболевания у людей, и спектр их распространения, увеличиваются.
Для усиления эффективности борьбы с вирусными болезнями необходима быстрая и точная лабораторная диагностика, позволяющая своевременно и научно обоснованно проводить соответствующие профилактические и противоэпидемические мероприятия.
Известно, что серологические методы диагностики направлены на выявление в крови пациентов «маркёров» многих вирусных заболеваний, в качестве которых чаще всего выступают противовирусные IgG- и IgM-антитела. Наличие в сыворотке крови высоких титров специфических, так называемых «анамнестических» IgG-антител свидетельствует о достаточно длительно текущем заболевании или о заболевании в стадии реконвалесценции.
Выявление специфических IgM-антител обычно указывает на раннюю стадию вирусной инфекции [1, 5, 8].
В лабораторной практике для выявления IgM чаще всего используется твердофазный ИФА, однако известно, что на определение с его помощью антител класса M, особенно в сэндвич-методе, могут оказывать существенное влияние различные факторы, присутствие которых в сыворотке крови может приводить к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.
В частности, на точность диагностики может влиять:
— высокая концентрация в сыворотке гетерофильных антител;
— инфицирование пациента эволюционно родственными вирусами;
— высокая концентрация вирус-специфических IgG после перенесенной инфекции [2, 3];
— наличие в сыворотке белков «острой фазы воспаления», в том числе С-реактивного белка (СРБ).
Для определения в крови вирус-специфических IgM используются в основном два метода. Первый — это непрямой твердофазный ИФА. Он основан на принципе связывания специфических к вирусу сывороточных IgM-антител с иммобилизованным на твердой фазе антигеном (вирусом). После удаления путем отмывки из сыворотки посторонних белков, таких, как IgG и СРБ, в лунки вносят меченые ферментом (пероксидазой хрена) антитела к IgM. Сигнал, величина которого прямо пропорциональна концентрации специфических антител, генерируется в ответ на добавление красителя. Данный формат метода используется, например, в иммуноферментных тест-системах (ИФТС), предназначенных для определения IgM к вирусу краснухи и цитомегаловирусу [2].