По всем вопросам звоните:

+7 495 274-22-22

УДК: 616.98;579. 842.14:578.74.001.8

Определение антигена сальмонелл в гистологических срезах методом реакции иммунофлюоресценции (РИФ)

Е. Лаковников д-р вет. наук, проф., ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», 196084, Россия, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5. Е-mail: galina-lakovnikov@yandex.ru

Сальмонеллез является широко распространенной контагиозной болезнью разных видов животных, а также людей. Он вызывается возбудителями из рода бактерий Salmonella семейства Enterobacteriaceae. В связи с этим возможным становится использование метода модифицированной гистологической диагностики с реакцией иммунофлюоресценции. Использовалась прямая реакция иммунофлюоресценции, проводившаяся на криостатных гистологических срезах из внутренних органов и тканей, павших от сальмонеллеза поросят-отъемышей. Применялась реакция иммунофлюоресценции с использованием диагностического флюоресцирующего сальмонеллезного иммуноглобулина к антигенам А, В, Д, выпускаемого предприятиями по производству биопрепаратов НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН. Образцы тканей и органов замораживали в жидком азоте. Замороженный материал использовали для приготовления срезов на замораживающем микротоме. Исследовали некроптаты печени и селезенки с регионарными лимфоузлами, брыжеечные лимфоузлы тонкого и толстого отделов кишечника, средостенных и бронхиальных лимфоузлов и легких. Посевы делали на МПА, среду Эндо, Олькеницкого, проводили оценку интенсивности роста колоний. Изучали серологические свойства по О- и Н-антигену, оценивали подвижность. С целью изучения серологических свойств сальмонелл проводили типирование в пластинчатой реакции агглютинации с применением сначала поливалентной (АВСDE) адсорбированной О-сыворотки, затем с отдельной групповой и далее с монорецепторами Н-агглютинирующими сальмонеллезными сыворотками производства Санкт-Петербургского института вакцин и сывороток. Полученные данные применимы в практической деятельности ветеринарных врачей и лабораторных специалистов при посмертной диагностике сальмонеллеза поросят, оперативно позволяют выяснить происхождение патологоанатомических изменений.

Литература:

1. Лаковников Е. А. Патоморфогенез сальмонеллеза поросят, вызванного разными сероварами: Автореф. дис. ... д-ра вет. наук. – СПб., 2006. – 26 с.

2. Лаковников Е. А., Сидоров В. Л. Обнаружение сальмонеллезного антигена в мазках-отпечатках методом РИФ: Метод. пособие для ветеринарных врачей рекомендовано СЗНЦ РАСХН. – СПб., 2000. – 12 с.

3. Прудников В. С. Иммуноморфогенез у животных, перорально вакцинированных против сальмонеллеза и влияние на него иммуностимуляторов: Автореф. дис. ... д-ра вет. наук. – Л., 1991. – 36 с.

4. Шор Г. В. О смерти человека (введение в танатологию). – Л.: КУБУЧ, 1925. – 258 с.

5. Яцышина С. Б. Выявление и типирование возбудителей сальмонеллеза молекулярно-генетическим методом: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. – М., 2003. – 18 с.

6. Coons A. H., Kaplan M. H. Localization of antigen in tissue cell, improvements in method for detection of antigen bymeans of fluorescent antibody // J. Exp. Med. – 1950. – Vol. 91. – P. 1–13.

Сальмонеллез является широко распространенной контагиозной болезнью разных видов животных, а также людей. Он вызывается возбудителями из рода бактерий Salmonella семейства Enterobacteriaceae (Лаковников Е. А., 2006, Прудников В. С., 1991; Яцышина С. Б., 2003). В частности, у свиней острое течение болезни характеризуется внезапным появлением, коротким сроком болезни, резким повышением смертности. При подостром или хроническом течении клинические признаки выражены характерно, смертность остается на высоком уровне.

В большинстве случаев для диагностики и дифференциальной диагностики сальмонеллеза у свиней post mortem необходимо проведение бактериологического исследования наряду с морфологическим. В связи с этим нам представляется возможным использование метода несколько модифицированной гистологической диагностики с реакцией иммунофлюоресценции. Этот метод позволяет обнаружить сальмонеллезный антиген в органах и тканях с большой долей достоверности.

Целью исследований явилось определение антигена сальмонелл в гистологических срезах методом реакции иммунофлюоресценции (РИФ).

Патологоанатомические исследования были проведены на материале, полученном от трупов и вынужденно убитых свиней из ряда хозяйств Ставропольского края Российской Федерации.

Патологоанатомически исследовано 10 трупов павших и вынужденно убитых свиней в возрасте до 4 месяцев, у которых был установлен сальмонеллез. Для уточнения диагноза и определения серотипа возбудителя в большинстве случаев отбирали материал для бактериологического исследования. От всех исследуемых отбирали материал для РИФ с замораживанием в жидком азоте.

Патологоанатомическое вскрытие трупов проводилось с полной эвисцерацией органокомплекса по методу Г. В. Шора (1925), все органы и ткани подверглись визуальной оценке, при этом наиболее тщательно – органы пищеварения, лимфоидная ткань кишечника, мезентериальные лимфоузлы и селезенка, тимус, миндалины, легкие, надпочечники, почки, головной мозг. Производили срочную фиксацию отобранного материала.

Для Цитирования:
Е. Лаковников, Определение антигена сальмонелл в гистологических срезах методом реакции иммунофлюоресценции (РИФ). Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2018;5.
Полная версия статьи доступна подписчикам журнала
Язык статьи:
Действия с выбранными: