В современной медицине и ветеринарии антибиотики играют доминирующую роль при лечении болезней бактериальной этиологии. Массовое и зачастую бессистемное применение антибактериальных препаратов привело к появлению и распространению резистентных штаммов микроорганизмов, что диктует необходимость создания новых лекарственных средств [2, 8, 9]. Одним из путей решения проблемы антибиотикорезистентности является создание комплексных препаратов, содержащих в своем составе два антибактериальных средства и более [1, 6, 7].
Аминогликозиды – довольно часто используемая группа антибиотиков в целях создания многокомпонентных лекарственных препаратов [9], в том числе и для производства комплексных средств, полученных с использованием фармацевтических биотехнологий. Их механизм действия связан с необратимым угнетением синтеза белка на уровне 30S-субъединицы рибосом у чувствительных микроорганизмов. В отличие от других ингибиторов синтеза белка, аминогликозиды оказывают не бактериостатическое, а бактерицидное действие. Их спектр действия охватывает большинство грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, в том числе протея, эшерихий, сальмонелл и стафилококков. Однако аминогликозиды применяют преимущественно при инфекциях, вызванных аэробными грамотрицательными бактериями. Количественное определение антибиотиков как одной из групп лекарственных соединений, получивших широкое распространение, но в то же время обладающих потенциальной опасностью для здоровья человека, является актуальной проблемой современной клинической, аналитической химии, ветеринарии, фармацевтической и пищевой промышленностей [4].
Цель исследования – валидация метода количественного определения активного вещества в субстанции гентамицина сульфата методом диффузии в агар.
Микробиологические методы анализа являются исторически первыми, которые применяются и в настоящее время для определения содержания антибиотиков. Метод диффузии в агар основан на способности антибактериальных средств диффундировать в агаровую среду, содержащую определенный тест-штамм с высокой чувствительностью к ним. Это обеспечивает угнетение роста микроорганизмов в виде образования прозрачных зон, диаметр которых зависит от концентрации активного вещества [5]. При валидации данной методики обязательными параметрами являлись следующие показатели: линейность; прецизионность (точность); правильность [3].