Гиалуронидаза относятся к семейству эндогликозидаз, которые выступают в качестве деполимеризующего агента гиалуроновой кислоты. Фермент является неотъемлемой частью живой системы и определяется в различных органах человека. Гиалуронидаза, преимущественно тестикулярная, зарекомендовала себя как высокоэффективный препарат за последние полвека в медицинской практике. Ввиду небольшого разнообразия лекарственных форм, был разработан прототип лекарственного средства на основе тестикулярной гиалуронидазы с пероральным способом приема [1]. Изучение возможного токсического воздействия и оценка безопасности разрабатываемых средств является необходимым этапом на доклиническом этапе. Метод оценки токсичности с использованием модели клеточных культур зарекомендовал себя в последние годы. Использование непосредственно культуры клеток человека позволяет получить данные близкие к проекции на организм человека. Модели культуры клеток in vitro являются инструментом в изучении и установлении характера повреждающего действия ксенобиотиков [2]. Исследование токсического воздействия на культуре клеток гепатоцитов человека выбрано не случайно. Печень выполняет ведущую роль в биотрансформации и метаболизме лекарственных средств. Повреждение органа является одной из причин, почему происходит отзыв лекарств из оборота на фармацевтическом рынке. Использование метода электронной микроскопии позволяет получить наглядную картину внутриклеточных структур, а, следовательно, и возможное влияние исследуемого средства на цитоархитектонику, которое в конечном итоге дает развернутое пояснение о его токсическом воздействии.
Цель исследования: ультраструктурный анализ воздействия пегелированной гиалуронидазы на культуре клеток гепатоцитов человека с позиции оценки токсичности и безопасности применения.
Объект исследования — тестикулярная гиалуронидаза H20, подвергнутая электронно-лучевой иммобилизации на полиэтиленоксиде Макрогол 1500 в потоке ускоренных электроном в дозе 1,5 Мрад на импульсном линейном ускорителе (Новосибирск, Россия), далее ПЭГ-ГИАЛ. ПЭГ-ГИАЛ исследовали в дозах 37 ЕД/мл, 75 ЕД/мл и 150 ЕД/мл.